平成25年11月21日判言渡 平成24年(行ケ)第10438号 審取消請求事件 口頭弁論終結日 平成25年11月7日判
原告
訴訟代理人弁護士 弁理士
被 告 指定代理人郡山順
小川慶子 瀬良聡機 堀内仁子
主文 原告の請求を棄却する。
 訴訟費用は原告の負担とする。
この判に対する上告及ひ上告受理申立てのための付加期間を30日と定 める。ティーエスエム アイヒー アセッツ
ヒー.フイ.
岡 崎 士 朗 長谷川 芳 樹 阿部寛 清水義憲 沖田英樹
特許庁長官
事実及ひ理由
第1 原告か求めた判 特許庁か不服2011-25609号事件について平成24年8月13日にした審を取り消す。
第2 事案の概要 本件は,拒絶査定不服審判不成立審の取消訴訟てある。争点は,1後記の本発と刊行物1発との相違点判断の誤りの有無及ひ2手続違背の有無てある。
 1 特許庁における手続の経緯 原告は,名称を「連続的灌流およひ交互接線流による細胞培養の方法」とする発につき平成17年3月4日を国際出日とする出をし(ハリ条約による優先権 主張外国庁受理,平成16年3月5日・平成16年9月27日欧州特許庁,平成1 7年10月13日国際公開,平成19年9月13日国内公表・特表2007-52 5984号,請求項の数15),平成23年2月22日付けて誤訳訂正書により補正 をしたか(請求項の数9),平成23年7月20日に拒絶査定を受けたのて,同年1 1月28日,不服審判請求をした(不服2011-25609号)。特許庁は,平成24年8月13日,「本件審判の請求は,成り立たない。」との審 をし,その謄本は同月28日に原告に送達された。(甲1,3,5,6)
2 本発の要旨
上記平成23年2月22日付け誤訳訂正書による補正後の請求項1の発(本 発)に係る特許請求の範囲の記載は,次のとおりてある。(甲3)「 細胞培養物中の,凝集細胞の凝集度合いを減少させる方法てあって,細胞培養培地及ひ凝集体を形成する固有の傾向を有する細胞の懸濁液を含む細 胞培養物か,連続的灌流培養システム内に維持され,前記細胞培養培地か前記細胞培養物に添加され,
前記細胞培養物か,中空繊維を含むフィルタモシュールにわたって循環され, 結果として前記細胞培養物よりも低い細胞密度を有する液体の流出か生し,前記フィルタモシュール内の流れか,フィルタモシュールの膜表面に対して接 線方向の流れ及ひ前記膜表面に対して垂直方向の,中空繊維の内側と中空繊維の 外側との間の流れてある,交互接線流てあり,培養を所望の細胞密度に達するまて継続する,方法。」
3 審の理由の要点 (1) 引用発
米国特許第6544424号細書(刊行物1〔甲8〕)には,次の発(刊行物 1発)か記載されている。(甲8,争いのない事実)「 培養培地を含む培養動物細胞の流体の灌流培養方法てあって,a) 一端かハイオリアクターへ,もう一端かタイヤフラムホンフに接続された, 中空繊維フィルタを含むコンハートメントを含み,タイヤフラムホンフは,ハイ オリアクターとホンフの間の中空繊維フィルタを通る,高速,低剪断の交互接線 流を形成し,培養動物細胞から濾過流体を分離し,濾過流体を補充するために新 鮮な培養培地を追加することかてきる,流体濾過システムを提供する工程,b) 前記流体をハイオリアクターからフィルタを含むコンハートメントに通し, 続いてタイヤフラムホンフまて流すことによって流体を濾過する工程,c) 前記流体の少なくとも一部分を,タイヤフラムホンフからフィルタを含む コンハートメント通して流して戻す工程,d) 任意に b)及ひ c)工程を反復する工程,
e) 濾過流体を濾過システムから除去する工程,及ひ
f) 濾過流体を補充するために新鮮な培養培地を追加する工程
を有する方法。」
(2) 一致点 本発と刊行物1発との一致点は,次のとおりてある。「 細胞の灌流培養方法てあって, 細胞培養培地及ひ細胞の懸濁液を含む細胞培養物か,連続的灌流培養システム内に維持され,
前記細胞培養培地か前記細胞培養物に添加され, 前記細胞培養物か,中空繊維を含むフィルタモシュールにわたって循環され,結果として前記細胞培養物よりも低い細胞密度を有する液体の流出か生し, 前記フィルタモシュール内の流れか,フィルタモシュールの膜表面に対して接 線方向の流れ及ひ前記膜表面に対して垂直方向の,中空繊維の内側と中空繊維の外側との間の流れてある,交互接線流てあり, 培養を所望の細胞密度に達するまて継続する方法てある点。」 (3) 相違点本発と刊行物1発との相違点は,次のとおりてある。
1 細胞か,本発ては「凝集体を形成する固有の傾向を有する細胞」てある のに対して,刊行物1発ては「培養動物細胞」てある点(相違点1)。2 細胞の灌流培養方法か,本発ては,「細胞培養物中の,凝集細胞の凝集度 合いを減少させる方法」てあるのに対して,刊行物1発ては,「培養培地を含む培 養動物細胞の灌流培養方法」てある点(相違点2)。(4) 相違点の判断
ア 相違点1について
1 刊行物1の記載(背景技術)によれは,流体濾過システムを培養動物細胞の 灌流培養に適用することは,動物細胞を培養培地とともに灌流培養し,培養培地か ら生物学的薬剤等を分離することを意図しているといえる。したかって,刊行物1発は,培養培地から生物学的薬剤等を分離することを意 図しているといえる。2 本細書(誤訳訂正書による補正後のものをいう。以下同し。)の記載(【0 021】【0022】【0051】)にある「PE.C6(登録商標)細胞」は,特 表2003-516733号公報(甲11)の記載(【0005】)によれは,足場 依存性細胞あるいは付着依存性細胞(培養容器壁等の足場に付着しないと生存し増 殖てきない細胞)とはいえす,また,本細書の記載(【0021】【0022】) にある「CHO(チャイニースハムスター卵巣)細胞」は,特開平8-30856 0号公報(甲12)の記載(【0013】)及ひ特表2002-534999号公報 (甲13)の記載(【請求項3】)のとおり,足場依存性細胞たけてなく浮遊性細胞 としても増殖可能てあることか本優先日前に広く知られていた。したかって,本発の「凝集体を形成する固有の傾向を有する細胞」は,足場 依存性細胞あるいは付着依存性細胞といわれるものに限らす,PE.C6細胞浮 遊性のCHO細胞等の動物細胞か有する程度の凝集する傾向を有しているものてあ ると解される。3 特表2003-516733号公報(甲11)には,PE.C6細胞を用い てワクチンを生成することか記載され(【請求項1】【請求項13】),特表2003 -521877号公報(甲16)には,CHO細胞を用いてM-CF(マクロフ ァーシコロニー刺激因子)を生成することか記載されている(【0183】~【01 87】)。したかって,PE.C6細胞,CHO細胞といった凝集傾向のある細胞は,本 優先日前に生物学的薬剤を製造する細胞として広く用いられていた。4 1~3から,刊行物1発にPE.C6細胞,CHO細胞といった生物学的 薬剤を製造するのに良く用いられるものてあり,「凝集体を形成する固有の傾向を有 する細胞」てあることか知られているものを用いることは,当業者か自然に行うこ とといえ,格別の困難性かあるとはいえいない。5 なお,刊行物1に記載されたものと同様のATF(交互接線流)システムを 用いて懸濁細胞を利用してヒト化MAbを製造したことか記載されている「GENETICENGINEERING NEWS,Vol.20,No.10,2000,P.52-53」(刊行物2〔甲9〕)には,マイク ロキャリアヘースの足場依存性の培養物中ては中空繊維モシュール(HFM)をス クリーンモシュール(M)に置換すると記載されているか,この記載は,PE. C6等のように足場依存性てはなく凝集傾向を有する細胞について,マイクロキャ リアとスクリーンモシュールを用いることを教示しているとはいえない。イ 相違点2について
1 刊行物1発の交互接線流は,中空繊維の内腔を行き来する流れてある。
 2 細胞凝集塊を分散させるためにヒヘットて細胞浮遊液の吸引と吐出を繰り返しおこなうヒヘッティンクは,本優先日前の慣用技術てあるから,細胞培養物か ヒヘットの先端の細い流路を行き来することて細凝集胞塊か分散されることは,当 業者かよく知る。3 ヒヘッティンクをよく知る当業者てあれは,刊行物1発の交互接線流によ り凝集した細胞をはらはらに分散てきることを予測する。4 1~3から,刊行物1発の培養動物細胞として,PE.C6細胞CHO 細胞といった凝集傾向のある細胞を用いて,刊行物1発の灌流培養方法を行うこ とにより,細胞培養物中の凝集細胞の凝集度合いを減少させる方法を実現すること に格別の困難性かあるとはいえない。ウ 本発の効果について 本発の高い細胞密度,高い細胞生存率,及ひ細胞の凝集か観察されないという効果は,刊行物1及ひ刊行物2の記載事項及ひ周知技術から予測し得たものてあ り,格別顕著なものとはいえない。(5) 審判断のまとめ 本発は,刊行物1発及ひ刊行物2に記載された発(刊行物2発)並ひに周知技術に基ついて当業者か容易に発をすることかてきたものてあるから,特 許法29条2項の規定により特許を受けることかてきない。したかって,その他の請求項に係る発についての判断を示すまてもなく本は拒絶すへきものてある。
第3 原告主張の審取消事由
1 取消事由1(相違点判断の誤り)
(1) 相違点1について 審は,刊行物2のマイクロキャリアヘースの足場依存性の培養物中ては中空繊維モシュールをスクリーンモシュールに置換するとの記載(53頁右欄11~34 行目)について,「PE.C6等のように足場依存性てはなく凝集傾向を有する細 胞についてまて,マイクロキャリアと,スクリーンモシュールを用いることを教示 しているとはいえない。」(14頁34~36行目)と認定した。しかしなから,技術常識を併せ考えると,刊行物2かマイクロキャリアに付着さ せた足場依存性細胞の培養の場合にスクリーンモシュールを用いることを教示する 理由は,マイクロキャリアのようにサイスか比較的大きいものを用いる場合には, 中空繊維モシュールは目詰まりし易いためてあると考えられる。ところて,本発 の「凝集体を形成する固有の傾向を有する細胞」か形成し得る凝集細胞も,マイ クロキャリアと同程度又はそれ以上の大きさを有し得る。そうすると,マイクロキ ャリアを付着させた足場依存性細胞の培養の場合に中空繊維モシュールてなくスク リーンモシュールを用いることを教示する刊行物2を参照した当業者は,マイクロ キャリアを付着させていないもののマイクロキャリアと同等又はそれ以上の大きさ の凝集細胞を形成し得る「凝集体を形成する固有の傾向を有する細胞」の培養の場 合についても,中空繊維モシュールよりもスクリーンモシュールか適していると考 える。そして,刊行物1は,中空繊維を用いる場合とともにスクリーンフィルタを 用いる場合を開示している(要約欄)。したかって,上記刊行物2の教示内容にかんかみれは,PE.C6細胞等の「凝 集体を形成する固有の傾向を有する細胞」を培養する場合に中空繊維を含むフィル タモシュールを用いることは,当業者か自然に行うことてあったとまてはいえない。よって,審の相違点1の判断には誤りかある。
 (2) 相違点2についてア 課題の認識の点 本発は,「凝集体を形成する固有の傾向を有する細胞」により凝集細胞か形成されると,細胞凝集体内の細胞の代謝フロフィールにおける不均一性により方法の 制御かより困難てあるため不利てあり,高い生存細胞密度と高い細胞生存率を得る ことか困難てあるという技術課題を考慮したものてある。このような課題は,「凝集 体を形成する固有の傾向を有する細胞」に特有のものてある。しかしなから,1刊行物1発は「凝集体を形成する固有の傾向を有する細胞」 を用いるものてはないのてあるから,上記課題を刊行物1から当業者か認識したと いえる根拠はない。特表2003-521877号公報(乙3)は,連続培養にお ける細胞の凝集によって生存細胞密度の低下か生しることまては示唆していないし, 特開平2-2336号公報(乙4)も,主観的な推察を述へているにすきない。また,2刊行物1には「・・・・・現在知られている,細胞から培地を分離するのに用 いられる灌流方法は,しはしは細胞を損傷する。・・・・・結果として生した,スクリー ン又はフィルタにおける,積み重なった死んた細胞と凝集体か,目詰まり灌流テ ハイスの故障の原因となる。・・・・・」(第2欄44~61行目)と記載されているか, [1]ここて言及されている「凝集体」か「凝集体を形成する固有の傾向を有する細胞」 によって形成された凝集細胞てあるとは解釈てきないし,[2]ここて言及されている フィルタの目詰まりは,凝集体自体かフィルタの膜に付着するなとして生しる物理 的な現象てあって凝集細胞の凝集度合いとは本質的に異なる現象てあり,[3]刊行物 1には凝集体自体か分散されなくても目詰まりか回避てきることか示唆されている (第14欄64行~15欄12行目)。そうすると,刊行物1に生存細胞密度との関 係に基つく凝集体自体の凝集度合いを減少させるという課題か存在することは認め られない。したかって,刊行物1発の灌流培養方法を,細胞培養物中の凝集細胞の凝集度合いを減少させる方法に用いることを当業者か容易に想到てきたとは認められない。 イ 課題解手段の点1刊行物1発の濾過システムとヒヘットとは,その目的,作用・機能及ひ形状 を全く異にし,当業者は,刊行物1発の中空繊維フィルタとヒヘッティンクとの 間に類似性を見出し,両者を関連させることはしない。また,2審かヒヘッティンクにより細胞凝集塊を分散てきることを開示してい るとした特開2003-219873号公報(甲17)の記載(【0005】)及ひ 特開2001-149099号公報(甲18)の記載(【0005】)にある細胞凝 集塊は,高密度て接触しなから長時間置かれたために細胞同士か接着したものてあ り,本発における細胞自体の「凝集体を形成する固有の傾向」によって形成さ れる凝集細胞とは異なるものてあり,両者の発生原因及ひ発生経過はらかに異な る。したかって,ヒヘッティンクにより分散される細胞凝集塊か,細胞か有する「凝 集体を形成する固有の傾向」によって形成された凝集細胞てあり得ることは示唆さ れていない。そうすると,上記各公報は,「凝集体を形成する固有の傾向を有する細 胞」によって細胞培養物中に形成される凝集細胞の凝集度合いを減少させる手段と してヒヘッティンクを開示するものてはない。そうてあれは,刊行物1発におい てヒヘッティンクを「凝集細胞の凝集度合いを減少させる」ために用いるようなこ とを当業者か試みることはない。なお,特表2003-521877号公報(乙3) の装置は,相対的に小さい直径の管による細胞の循環に関して蠕動性ホンフを用い て培地を循環させるものてあり(【0045】【0166】),同公報か交互接線流を 教示するものてはなく,特開平2-2336号公報(乙4)の設備は,マスターフ レックス蠕動式ホンフを用いるものてあり(5頁右下欄6~7行),同公報も交互接 線流に関して教示するものてはない。逆に,3ヒヘッティンクを過度に行うと浮遊細胞か損傷すると考えるのか技術常 識てあるところ,刊行物1発には細胞凝集塊を分散させるに当たり細胞の損傷を 回避しようとする技術思想はなく,刊行物1にはヒヘッティンクのように細胞凝集塊を強い剪断力により分散する手段に起因する細胞の破壊について何ら教示はして いない。そうすると,刊行物1発の濾過システムをヒヘッティンクと同様の作用 効果を有するとみなした当業者てあれは,刊行物1発の濾過システムはヒヘッテ ィンクと同様に細胞を損傷するものと予測するはすてある。したかって,刊行物1 発の灌流培養方法を細胞培養物中の凝集細胞の凝集度合いを減少させる方法に用 いるようなことは阻害されている。ウ 小括 以上から,審の相違点2の判断には誤りかある。
(3) 本発の効果について 本発の方法によれは,連続的灌流培養システムにおいて,5個以上の細胞により形成される凝集体(凝集細胞)か,多くとも細胞の総量の5%以下となり,可 視凝集体なしに単一細胞の懸濁液てある培養物さえもたらすことか可能てある。そ の結果,酸素栄養素か不足して死に至る凝集細胞中の細胞か低減されるため,高 い細胞密度てありなから,高い細胞生存率を達成することかてきる(本細書【0 015】~【0020】)。そして,交互接線流と中空繊維モシュールとの組合せを適用して細胞培養物の連 続的灌流培養を行った本発の実施例1においては,PE.C6細胞の凝集か全 く観察されす,高い生存細胞密度か達成され(本細書【0041】~【005 1】,図3等),ハッチ培養フェトハッチ培養の約10倍,そして,スヒンフィル タ保持テハイス音響保持テハイスを用いて連続的灌流培養を行った場合の約3~ 5倍の最大生存細胞密度を得ることかてきる。さらに,本発の方法によれは, 培養した細胞から得られる抗体濃度(生産性)収量についても,他の比較例の方 法を用いた場合よりも高い結果となっている。このように,本発の方法によれは,連続的灌流培養システムにおいて,「凝集 体を形成する固有の傾向を有する細胞」による凝集細胞の凝集度合いを減少させる ことかてき,その結果,高い細胞密度てありなから,高い細胞生存率を達成することかてきる。
 一方,刊行物1発は,動物細胞一般について,ハッチ培養と比較して高い生存細胞密度か得られることにととまる。 したかって,本発の顕著な効果を認めなかった審の判断には誤りかある。2 取消事由2(手続違背)
審は,相違点の判断において,特表2003-516733号公報(甲11), 特開平8-308560号公報(甲12),特表2002-534999号公報(甲 13),特開平5-41984号公報(甲14),特開平2-113896号公報(甲 15),特表2003-521877号公報(甲16),特開2003-21987 3号公報(甲17)及ひ特開2001-149099号公報(甲18)の記載を引 用したか,これら公報は審において初めて開示されたものてあり,拒絶理由通知 書及ひ拒絶査定ては一切引用されていない。また,審は,ヒヘッティンクと刊行物1発の交互接線流とを行き来する流れ の点て類似する技術と認定しているか,拒絶査定ては,「凝集体に剪断力を作用させ て脱凝集させること」か周知てあったとしており,行き来する流れによって細胞凝 集塊を分散させることについては一切言及していない。そうすると,審の判断は, 拒絶査定において審査官か示した判断から論旨を変更している。したかって,審判手続においては,引用文献に甲第11号証から第18号証まて を追加した新たな拒絶理由通知か行われるへきてあったのてあり,そのような拒絶 理由かされていれは,原告は,意見書を提出し又は手続補正をすることかてきた。そのような拒絶理由通知をせすにされた審は,原告の反論及ひ補正の機会を不 当に奪ったものてあり,特許法159条2項て準用する同法50条に違背した違法 かあり,かつ,その違法はらかに審の結論に影響かある。第4 取消事由に対する被告の反論
1 取消事由1(相違点判断の誤り)に対し (1) 相違点1について1 刊行物1発は,培養をしなから濾過を行って濾過流体を分離し,新鮮な培 養培地を追加するものてあって,培養と濾過を同時に連続的に行うものてある。ま た,刊行物2発も,刊行物1発と同様の流体濾過システムを用いて灌流培養を するものてあって,培養と濾過を同時に連続的に行うものてある。したかって,刊 行物1発及ひ刊行物2発のいすれもハッチ細胞培養を行うものてはなく,両者 とも交互接線流により凝集傾向のある細胞の凝集度を自然に減少させることか予測 される。したかって,ハッチ細胞培養を行うことて生しる原告主張に係る凝集体の サイスをもとに,中空繊維モシュールよりもスクリーンモシュールか適していると 考えるのは,刊行物2の記載の合理的な理解てはない。2 刊行物2か足場依存性細胞の場合には中空繊維モシュールてはなくスクリー ンモシュールを用いることを教示するのは,マイクロキャリアヘースの培養のため の高効率灌流テハイスにするためてある。また,刊行物1にも,マイクロキャリア を使った足場依存性細胞の灌流培養にスクリーンメッシュフィルタモシュールを適 用すること,スクリーン開口部よりも大きいマイクロキャリアはシステムの中に残 されることか記載されている(第10欄28~47行目,第10欄66行~11欄 13行)。そうすると,刊行物1刊行物2は,足場依存性細胞の灌流培養にマイクロキャ リアを使った場合にはスクリーンモシュールを用いることを教示しているにすきな いと解するのか自然てある。3 12のとおり,刊行物2か,PE.C6等のように足場依存性てはなく凝集 傾向を有する細胞の培養について,マイクロキャリアとスクリーンモシュールを用 いることを教示しているとはいえない。よって,審の相違点1の判断には誤りはない。
 (2) 相違点2についてア 課題の認識の点 本発は,刊行物1発の流体濾過システムをそのまま用い(本細書【0004】【0010】),刊行物1において,刊行物1発の流体濾過システムか動物 細胞の灌流培養に使用てき,生物学的製剤を製造する過程て使用することも開示さ れていることに従い(刊行物1第1欄30~44行目),生物学的薬剤を製造するの によく用いられる動物細胞てあるPE.C6細胞CHO細胞といった細胞を培 養し,その結果として,刊行物1の記載(刊行物1第14欄44~63行目)のと おりに高い細胞密度を実現し,生産性を向上したことを確認し,結果的に,細胞の 凝集か観察されなかったとするものてある(本細書【0019】【0051】)。1原告か主張する「凝集体を形成する固有の傾向を有する細胞」により凝集細胞 か形成されると高い生存細胞密度等を得ることか困難てあるという技術課題は,特 表2003-521877号公報(乙3)の記載(【0045】)特開平2-23 36号公報(乙4)の記載(6頁右下欄16~19行目)に細胞の凝集と内部細胞 の活性に関連かあることか開示されているように,当業者に周知の課題にすきない。また,2刊行物1ていう「凝集体」かとのようなものてあるのかは特に説され てはいないものの,凝集した物か目詰まりの原因となることから,目詰まりになる ような凝集物か観察されない方かよいことは当然といえる。そして,ヒヘッティン クは本優先日前の慣用技術てあって,当該慣用技術は細胞凝集塊を分散させると の課題の下て行われている。そうすると,[1]刊行物1発の流体濾過システムによ る培養培地を含む培養動物細胞の灌流培養方法を,[2]<1>生物学的薬剤を製造する のによく用いられる動物細胞てあるPE.C6細胞CHO細胞といった凝集傾 向のある細胞に適用し,<2>刊行物1発の中空繊維の内腔を行き来する交互接線流 により凝集する傾向を有する細胞かはらはらに分散されることを予測して,<3>高い 細胞密度を実現し,フィルタの目詰まりになるような凝集物か観察されないとする ものてあることは理解てきる。したかって,刊行物1発を,細胞培養物中の凝集細胞の凝集度合いを減少させる方法とすることは,刊行物1の記載及ひ周知技術から当業者か容易になし得たこ とてある。イ 課題解手段の点
1 刊行物1の記載(第7欄32~40行目,第14欄64行~15欄12行目)によれは,刊行物1発の交互接線流は,容器とホンフとの間の中空繊維の内腔を 行き来する流れてある。一方,ヒヘッティンクは,小学校の理科の授業ても用いる ヒヘットて細胞浮遊液の吸引と吐出,すなわち,行き来する流れを繰り返すことに よって細胞凝集塊を分散させるという慣用技術てある。そうすると,刊行物1発 の交互接線流の行き来する流れか,中空繊維又はフィルタ膜への凝集体の接着を大 幅に阻止するたけてなく,細胞凝集塊も分散させるてあろうことは,ヒヘッティン クによる行き来する流れによって細胞凝集塊か分散することをよく知る当業者てあ れは,当然に予測し得たことといえる。原告の主張は,刊行物1発の灌流培養方法のもっとも特徴的な部分てある交互 接線流,すなわち行き来する流れによる動作原理に着目することなく,また当業者 の通常の創作能力の発揮を無視した硬直的な見方てある。2 特開2003-219873号公報(甲17)及ひ特開2001-1490 99号公報(甲18)て開示されているヒヘッティンクにより分散する細胞凝集塊 も,本発の「凝集体を形成する固有の傾向」によって形成される細胞同士の接 着からなる凝集細胞も,細胞同士か接着したものてある点において異なるものては ない。また,中空糸フィルタの相対的に小さい径の管への流れホンフ輸送の物理的応 力によっても細胞の凝集か分散されることも,特表2003-521877号公報 (乙3)の記載(【0045】)及ひ特開平2-2336号公報(乙4)の記載(3 頁左上欄2~17行目,6頁右下欄16~19行目)のとおり知られているものて ある。したかって,本優先日前の慣用技術てあるヒヘッティンクによって細胞同士か接着した細胞凝集塊か分散することをよく知る当業者てあれは,刊行物1発の交 互接線流の特徴的な動作てある行き来する流れによって,ヒヘッティンク同様に「凝 集体を形成する固有の傾向を有する細胞」同士の接着もはらはらにして分散し得る ことを十分予測し得た。3 刊行物1には,従来,細胞から培地を分離するのに用いられる灌流方法ては, システムの剪断力による直接的な物理的途絶なとから,しはしは細胞を損傷してい たか,刊行物1発の灌流方法ては,培養物に剪断エネルキーを最小限加えること によってスケールアッフと高流量か得られ,ハッチフロセスて達成される細胞密度 の約1倍から約20倍の細胞密度を達成したことか判した旨か記載されている (第2欄44~61行目,第14欄44~63行目)。そうすると,刊行物1には, 刊行物1発の灌流方法か,システムの剪断力による直接的な物理的途絶を回避し て,低剪断流を生み出し,培養物に剪断エネルキーを最小限加える手段を有するこ とか記載されているといえ,ヒヘッティンクを過度に行うことて浮遊細胞か損傷す ることと同様のことか生しるのを回避するものてある。したかって,阻害される事情か存在するとの原告の主張は失当てある。
 ウ 小括以上から,審の相違点2の判断に誤りはない。 (3) 本発の効果について刊行物1には,刊行物1発の灌流培養方法か,高い細胞濃度を維持することに より生産性を向上させるためにも用いられ得るものてあって(第1欄30行~44 行目),また,刊行物1発における灌流培養方法によって達成される細胞密度は, ハッチフロセスて達成される細胞密度の約1倍から約20倍てあることか判した (第14欄第44~63行目)と記載されているのたから,高い細胞密度,高い細 胞生存率か得られるとの効果は,刊行物1から予測し得たものてある。そして,細胞凝集塊を分散させるという課題を解する手段としてヒヘッティン クをよく知る当業者にとっては,刊行物1発の中空繊維の内腔を行き来する交互接線流により,凝集する傾向を有する細胞をはらはらに分散することを予測し得た といえることから,細胞の凝集か観察されないとの効果についても,刊行物1から 予測し得たことてある。よって,審の本発の効果の判断に誤りはない。
2 取消事由2(手続違背)に対し
1 審は,本発の「凝集体を形成する固有の傾向を有する細胞」か足場依 存性細胞付着依存性細胞といわれるもののみを意味するものてあるのか,それ以 外の凝集体を形成する傾向を有する細胞も含まれるのかを把握するために,本 細書中て最も好ましく使用される細胞として記載されている「PE.C6(登録商 標)細胞」について,特表2003-516733号公報(甲11)の記載を引用 し,「PE.C6(登録商標)細胞」は,足場依存性細胞又は付着依存性細胞とい われるものとはいえないとの技術常識を認定した(13頁31~33行目)。同しく 本細書に例示されている「CHO(チャイニースハムスター卵巣)細胞」につ いて,特開平8-308560号公報(甲12),特表2002-534999号公 報(甲13),特開平5-41984号公報(甲14),特開平2-113896号 公報(甲15)の記載を引用し,「CHO(チャイニースハムスター卵巣)細胞」は, 足場依存性細胞たけてなく浮遊性細胞としても増殖可能てあるとの技術常識を認定 した(13頁34行~14頁1行目)。2 また,審は,刊行物1発か灌流培養方法によって培養することを意図し ている「生物学的薬剤を製造するのに用いる細胞」を把握するために,特表200 3-516733を号公報(甲11)と特表2003-521877号公報(甲1 6)を用いて,「PE.C6(登録商標)細胞」「CHO(チャイニースハムスター 卵巣)細胞」といった凝集傾向のある細胞を用いることか周知技術てあったことを 認定した。3 さらに,審は,ヒヘッティンクか本優先日前の慣用技術てあったことを認定する趣旨て,特開2003-219873号公報(甲17)及ひ特開2001 -149099号公報(甲18)を用いた。4 平成22年11月17日付け拒絶理由通知書(甲2)ては,本発は刊行 物1発(引用文献1)刊行物2発等に基ついて当業者か容易に発をするこ とかてきたものてあるとしている。また,平成23年7月20日付け拒絶査定(甲 5)ては,平成22年11月17日付け拒絶理由通知書に記載した上記理由によっ て拒絶すへきものとし,その備考欄において「微生物,植物細胞及ひ動物細胞の培 養において,・・・・・細胞凝集体を形成して増殖する場合かあること,及ひ当該凝集体 に剪断力を作用させて脱凝集させることは,本優先日前に周知てあった」との技 術常識を示し,「引用文献1-5記載の発に接した当業者てあれは,・・・・・細胞凝 集体か剪断力を受け,凝集度合いか減少することは自てある。」と判断している。
 審は,この「凝集体に剪断力を作用させて脱凝集させること」として具体的に「ヒ ヘッティンク」を挙け,ヒヘッティンクか慣用技術てあったことを示すとともに, ヒヘッティンクをよく知る当業者てあれは,刊行物1発の中空繊維の内腔を行き 来する交互接線流により凝集した細胞をはらはらに分散てきることは,予測するこ とと判断した。したかって,審は,拒絶査定において審査官か示した判断から何 ら論旨を変更したものてはなく,判断の枠組みを変更したものてもない。5 上記1から4まてのとおり,審は,新たな拒絶理由を付加したものてはな く,また,原告の反論及ひ補正の機会を不当に奪ったものてもないのてあるから, 原告の防御権を奪うものてはない。したかって,審判手続には特許法に規定されて いる手続に違背した瑕疵はない。第5 当裁判所の判断
1 本発について
(1) 本件細書の記載 本発の出時細書に対応する特表2007-525984号公報(甲1)及ひ平成23年2月22日付け誤訳訂正書(甲3)によって訂正された細書(本 細書)には,次の記載か認められる。「【0001】本発は,細胞の灌流培養に関する。
 「【0002】本発は,細胞培養培地およひ細胞を含む細胞培養物の灌流培養による細胞の培養のための方法を開示するか,ここて細胞培養培地は細胞培養物に添加され,ここて細胞培 養物は中空繊維を含むフィルタモシュールにわたって循環され,結果として細胞培養物よりも 低い細胞密度を有する液体の流出か生し,ここてフィルタモシュール内の流れは交互接線流て ある。」「【0003】意外にも,本発による動物細胞,具体的には哺乳類細胞,または酵母細胞の 灌流培養によって,きわめて高い生存細胞密度を得ることかてきるか,細胞培養物はさらにき わめて高い細胞生存率を提示することか見出されている。さらに,本発の灌流方法か培養物 における少ない細胞凝集,およひ可視凝集体なしに単一細胞の懸濁液てある培養物さえもたら すことか見出された。これは,灌流細胞培養なと低い剪断条件の使用か,一般的には細胞の解 離をもたらすことかないのて,驚くへき所見てある。灌流細胞培養時の細胞凝集は,例えは, 細胞凝集体内の細胞の代謝フロフィールにおける不均一性により方法の制御かより困難てある ため不利てある。これは特に,細胞か5個の細胞もしくはそれ以上の凝集体を形成する場合, かつその凝集体か全体て細胞の総量の5%もしくはそれ以上を構成する場合に厄介てある。」「【0004】灌流方法か米国特許第6,544,424号細書〔判注 刊行物1〕に記載 されている。この文書は,この方法か動物細胞の灌流培養に使用てきることに言及してはいる か,本発において見出されたきわめて高い細胞密度を開示も示唆もしていない。さらに,米 国特許第6,544,424B1号細書は,灌流方法か中空繊維の膜表面上の障害物の付着お よひ増殖を減少させうることを開示しているか,細胞培養物そのものにおける細胞か凝集しな いことを開示も示唆もしていない。」「【0006】細胞の灌流培養は,当技術分野におけるその従来の意味を有し,すなわち,培 養時に細胞か分離テハイスによって保持されることを意味するか,ここて分離前よりも低い細胞密度を有する液体の流出かあり,かつ細胞培養培地の流入かある。本発の方法においては, 分離テハイスは中空繊維を含むフィルタモシュールてある。」「【0008】『中空繊維』という語ては管膜か意味される。管の内径は,好ましくは,0. 3~6.0mm,・・・・・てある。好ましくは,膜のメッシュサイスは,メッシュの孔のサイスか 細胞の直径に近く,細胞の高い保持力を確保すると同時に,細胞残屑かフィルタを通過しうる ように選択される。好ましくは,メッシュサイスは3~30μmてある。」「【0009】中空繊維を含むフィルタモシュールは,・・・・・市販されている。」「【0010】『フィルタモシュール内の交互接線流』により,中空繊維の膜表面と(すなわ ち,その接線と)同し方向ての1つの流れかあり,中空繊維をその流れか往復し,かつ前記フ ィルタ表面に対して実質的に垂直の方向て別の流れかあることか意味される。接線流は,当業 者に周知の手法に従って達成されうる。例えは,米国特許第6,544,424号細書〔判 注 刊行物1〕においては,交互接線流か中空繊維を含むフィルタモシュールにわたって細胞 培養物を循環させる1つのホンフを使用し,かつ細胞培養物より低い細胞密度をフィルタ分離 前に有する液体を除去する別のホンフを使用することにより達成されることか記載されてい る。」「【0011】本発の方法においては,細胞の培養に適したすへてのタイフの細胞培養培地 か原則として使用されうる。」「【0014】本発の方法に有利にかけられる細胞は,この方法,すなわち,きわめて高い 生存細胞密度およひきわめて高い細胞生存率への培養から恩恵を受けるすへての細胞タイフて ありうる。」「【0015】本発の方法によれは,きわめて高い生存細胞密度か,少なくとも 80×106・・・・・ てある。」「【0016】意外にも,本発のきわめて高い細胞密度は,きわめて高い細胞生存率によっ て達成される。」「【0018】本発の方法は,動物細胞または酵母細胞の培養,特に哺乳類細胞の培養に適 している。」「【0019】本発の方法はさらに,培養時,特に灌流培養時に凝集体(いわゆる凝集細胞) を容易にかつ本質的に形成する細胞の培養に特に適している。意外にも,本発の方法は,フ ィルタ膜上の凝集体除去を減少させるたけてはなく,灌流培養方法時の細胞の凝集,凝集体を 形成する固有の傾向を有する細胞の凝集も減少させる。本発による凝集細胞の培養は,結果 として,少なくとも5個の細胞の凝集体か最大ても細胞の総量の5%・・・・・を含む,培養をもた らす。特に好ましくは,本発による凝集細胞の培養は,結果として,真の単一細胞懸濁液て ある培養をもたらす。」「【0020】凝集細胞は,少なくとも5個の細胞の凝集体を形成する細胞てあり,その凝集 体は全体て細胞の総量の少なくとも5%を含んてなる。」「【0021】哺乳類細胞の例としては,CHO(チャイニースハムスター卵巣)細胞,ハイ フリトーマ,BHK(ヘイヒーハムスター腎)細胞,骨髄腫細胞,ヒト細胞,例えは,HEK -293細胞,ヒトリンハ様細胞,PE.C6(登録商標)細胞,マウス細胞,例えは,N O細胞か挙けられる。」「【0022】好ましくは,哺乳類細胞,より好ましくは,CHO,NO,PE.C6(登 録商標)細胞か使用される。好ましくは,その培養(凝集細胞)時の凝集反応について周知の 細胞も使用される。最も好ましくは,PE.C6(登録商標)細胞か使用される。」「【0041】実施例1:生物製剤の製造のためのヒト細胞系PE.C6(登録商標)の方 法最適化」「【0043】材料と手法 細胞系およひ維持:PE.C6(登録商標)細胞系をヒトI gGを産生する本試験において使用した。・・・・・PE.C6(登録商標)細胞系は,ホスホク リセレートキナーセフロモータを使用することによりアテノウイルスタイフ5(ad5)E1 遺伝子て不死化したヒト胚細胞系てある。」「【0045】細胞保持:3種類のテハイスを使用してリアクター内て細胞を保持した。最初 に10μmの細孔径を有するスヒンフィルタ・・・・・を使用した。次に,Biosep AD10 15細胞保持システム・・・・・を使用した。最後に,関連中空繊維膜モシュールを有するATF- 4制御ユニットおよひハウシンク・・・・・を評価した。」「【0051】ATFユニットを使用した連続的灌流実験は,非常に高い細胞密度およひ生成物濃度(100×106細胞/mLおよひ0.9g/L/日)を達成する大きな可能性を示すか, PE.C6(登録商標)細胞の凝集は観察されなかったと結論つけることかてきる。」(2) 刊行物1の記載 刊行物1(訳文は乙5による。)には,次の記載か認められる。「(要約)流体,特に生物学的流体の濾過システム。濾過システムは,一端て貯蔵容器へ,も う一端て隔膜ホンフに接続された,フィルタを含んたコンハートメントを含む。フィルタは中 空繊維モシュールまたはスクリーンフィルタを含む。容器は,濾過されるへきフロセス流の貯 蔵容器として提供される。タイヤフラムホンフは,容器とホンフの間の,また,中空繊維また はスクリーンフィルタを通った,高速,交互,低剪断の接線流を生成するための手段を提供す る。システムは,流体からの老廃物の容易な分離およひ,濾過された流体を補充するために新 鮮な流体を追加することを許す。」「(第1欄30~44行目)濾過は,典型的には流体溶液,混合物または懸濁液を分離し,精 製・変性させ,およひ/または濃縮するために実施される。ハイオテクノロシーおよひ製薬業 界ては,濾過は新規な薬剤,診断法,およひ他の生物学的物質を首尾よく生産,加工,試験す るために不可欠てある。例えは,動物細胞培養を用いて生物学的薬剤を製造する過程において, 濾過は培養培地からある種の構成成分を精製し,選択的に除去し,およひ濃縮するために,ま たは培地をさらなる加工の前に変性させるために実施される。また,濾過は,灌流培養におい て高い細胞濃度を維持することにより生産性を向上させるためにも用いられ得る。本発は, 物理的かつ/または化学的性質に基つく分子あるいは粒子状物質の混合物または懸濁物の分画 化の改善された手段を提供する。」「(第1欄45行~56行目)化学的およひ物理的特性に従って物質を分離するために,いく つかの特殊化したフィルタおよひ濾過方法か開発されてきた。当技術分野て開発されてきたフ ィルタには平面フィルタ,フリーツフィルタ,マルチユニットカセット,中空繊維のような管形状フィルタなとかある。しかし,こうしたフィルタの多くは寿命か短く,懸濁液又は他の生 物学的流体を濾過するためにフィルタか用いられた場合,フィルタは死んた細胞,細胞残屑, 凝集体及ひ他の流体成分て目詰まりする傾向にある。この点について米国特許番号5,527, 467は,溶質分子の逆濾過を減らすことかてきる,一方向性の整流効果かある薄膜を持つ生 物反応器を記述している。」「(第2欄8~43行目)動物細胞は大部分の微生物より大幅に成長か遅く,保護細胞膜を欠 くため,壊れすい。撹拌速度を高めたり,カスを培養物に大量に供給したりすることによる, 微生物培養の生産性を上けるためのいくつかの既知の方法は,動物細胞に対しては実行てきな い。従って,生産は極めて穏かな培養条件と低い細胞濃度に限定されている。培養条件を穏 かに維持しつつ細胞濃度を高める1つの方法は灌流培養法てある。細胞を成長させるための灌流培養法ては,栄養素か消費され,有害な老廃物のレヘルか高ま った培地は継続的に培養物から除去され,新鮮な培地と交換される。新鮮な培地の継続的な追 加と老廃物の除去によって,細胞に必要な栄養素か供給され,細胞濃度は高くなる。ハッチ培 養生産法におけるような常に変化する条件と異なり,灌流培養法は一定の条件て培養物を生成 し維持する方法を提供する。通常のハッチ培養生産過程ては,ます細胞を新鮮な培地に植菌する。すると細胞は急激に対 数増殖期に入る。細胞か培地栄養素を消費し,老廃物か蓄積すると,細胞は定常状態に移行し, さらに減衰相に移る。ハッチ培養生産を改善しようとしていくつかの方法か開発されたか,い すれの場合も,これらの過程は急速な発育と減衰サイクルに陥るのてあった。しかし灌流培養 法ては,培養物によって生成された老廃物か連続的に除去され,培養物には連続的に新鮮な培 地か補充されるのて,細胞濃度と生産性か一定に保たれ平衡状態を得ることかてきる。通常, 約1培養液量か1日て交換され,灌流て得られる細胞濃度は通常ハッチ培養て得られるヒーク 値の2倍から10倍てある。」「(第2欄44~61行目)灌流培養法の潜在的利益にも関わらす,灌流培養法はそれほと受 け入れられてはいない。主要な理由の
 1 つは,現在使用されている灌流装置の信頼性か低いと いうことにある。現在知られている,細胞から培地を分離するのに用いられる灌流方法は,しはしは細胞を損傷する。この破壊はシステムの剪断力による直接的な物理的途絶,培地の中の 栄養素の枯渇,イオン強度pHなとの培養物状態の生理的な状態の変化,細胞か放出する成 長抑制要素への曝露によって生しるのかもしれない。結果として生した,スクリーン又はフィ ルタにおける,積み重なった死んた細胞と凝集体か,目詰まり灌流テハイスの故障の原因と なる。灌流培養て典型的に見られる高い細胞濃度ては,こうした問題か重大なものとなる。こ のことは,多数の灌流装置かフロセス容器に入っていて製造過程ては交換てきない場合に,特 に起こりすい。そうした内部システムか故障すると,全体的な製造過程も停止してしまう。」「(第3欄35~55行目)しかし,スヒン-ハスケット法と同様に,中空繊維フィルタは膜 表面上における微粒子およひセラチンの蓄積によって詰まりすい。中空繊維カートリッシを 通した一方向ての再循環は,典型的には管腔入口て詰まった凝集体による中空繊維管腔の閉塞 を引き起こす。そのような凝集体は,より多くの中空線維かフロックされるにつれてサイスか 大きくなり,濾過容量か減少し得る。したかって,廃媒質または流体か連続的に除去されるとともに,流体か連続的に新しい媒質 て満たされるような濾過システムを作り出すことか要求されている。また,交互接線流を発生 させるような濾過システムを作り出すことも求められており,それは,たとえは生体液なとの 流体について,細胞への損傷または特定のフロセスの他の構成要素への損傷を最小限にするよ うに連続的な濾過を行い,閉塞を最小限にし,フロセスの中断を最小限にするように中間フロ セスにおいて置換されることか可能てあり,全ての部分について殺菌可能てあるとともに無菌 状態を維持することか可能てあり,フロセス容器への一つの接続のみ有することかてき,かつ 殆とのフロセスに適用され得る。本発は,これらの課題の解策を提供するものてある。」
「(第6欄12~21行目)本発は,流体濾過システムに関し,概略,少なくとも一つの流 体貯蔵容器,容器からフィルタを含むコンハートメントを通るように流体を案内するための流 体コネクタ,流体をフィルタを含むコンハートメントを通して交互方向に流す少なくとも一つ のタイヤフラムホンフ,およひ少なくとも一つの流体回収ホートを有する。本システムは,高 速,低せん断,接線流濾過を実施するのに有用てある。そのようなシステムは,培養された動物細胞の灌流にも,他の様々な濾過にも適用される。」 「(第6欄22~27行目)図1を参照すると,この発による流体濾過システムか示されている。フロセス容器2は,流体コネクターにより,フィルタコンハートメント4に接続してい る。容器2は,濾過される流体に適した容器てある。例えは,ハイオリアクター,発酵槽また は他の容器てよ(い)」「(第7欄25~26行目)除去フィルタエレメントは,最も好適には,中空繊維またはスク リーンメッシュから構成されるものてある。」「(第7欄32~40行目)タイアフラムホンフ24は,流体を,容器2から,コンハートメ ント4中のフィルタ18を通して,ホンフ24に移動するのに用い,それから,流体の流れを 逆転し,流体をホンフ24から,フィルタを通して容器2に戻す。このようにして,フィルタ 18を通る交互接線流か形成される。フィルタ18か中空繊維の場合,フィルタ18の入口端 20及ひ出口端22の両端は,ハウシンクの壁にシールされ,retantate 側3とフィルタ側7 の混合を防く。」「(第8欄27~50行目)図1は,交互接線流のコントローラを示す。コントローラは,圧 力変換器のような圧力測定装置て構成され,圧力チャンハー28,30中の圧力を,フロセス 容器2に関連して,モニターし制御する。・・・・・これらは,示したような交互接線流(ATF) コントローラにより,フロセスの要求に適合する。結果として,フィルターを通って行き来す る流体の流れは制御される。例えは,動物細胞て実施する場合,もしチャンハー28か,タイ ヤフラム32かチャンハー30のホンフの内壁に対して,押し進める位置まて,拡張した場合, 細胞は損傷を受ける。ホンフの壁とタイアフラムとの間に,細胞か補足されるのを最小限或い は回避するために,チャンハー30の壁は,チャンハー28の壁より,若干大きい半径を有す る。」「(第9欄5~13行目)フィルタを含むコンハートメント4はまた,好ましくは流体回収ホ ートに適した少なくとも一つの開口44を有する。流体回収ホート44はフィルタコンハート メント4から濾過流体を除去するのに適している。最も好ましい実施形態において,濾過ホン フ46は回収ライン50に接続されている。濾過ホンフ46はシステムからの濾過流体の除去を調節する手段として適しているとともに,コンハートメント7からの流体の無制限な流れを 調整する逆止弁として機能する。」「(第10欄28~47行目)本発の
 1 つの実施例を詳細に開示したか,他の多くの変形も 考えられる。図2A-2Cは,本発の別の実施例てある。ここてはスクリーンメッシュフィ ルタモシュール18か上記中空繊維フィルタモシュールの代わりに使われている。提示された 例ては,このようなスクリーンモシュール18はヘース84,ストッフ85,トッフ86,ホ スト89を内蔵し,ヘースとトッフとの間の距離を固定している。管状スクリーンメッシュフ ィルタ82はOリンクを両端に固定している。スクリーンメッシュフィルタはナイロン,ステ ンレススチール,ホリエステルスクリーン織物から作成してもよい。これらはコンハートメン ト4を通過する液体を濾過する。スクリーンスヘーシンクは,考慮中の用途に基つき当業者な ら容易に定てきる。中空繊維フィルタの使用と同し方法て,濾過する液体はフロセス容器2 とタイヤフラムホンフとの間を流れる。しかし,濾過された液体はフィルタに垂直になったフ ィルタ内蔵ハウシンクから取り出しライン50を通して除去される。好ましい実施例ては,ス クリーンは約5μm から約200μm の範囲のオーフン・スヘーシンクを持っている。さらに好 ましくは約20μm から約75μm のオーフン・スヘーシンクを持っている。」「(第10欄66行~11欄13行目)図2A-2Cのシステムその他の可能な構成は,マ イクロキャリアを使った足場依存性細胞の灌流媒質交換にも適用てき,また分別を要する他 の用途,サイスによる粒子の回収濃縮にも使える。スクリーン開口部より大きな粒子は残さ れる。ホンフ24による交互流は,分離フロセスを容易にする。例えは,図2A-2C構成て は,媒質をマイクロキャリアに妨けられすに濾液ライン50を通してシステムから除去てきる。
 スクリーン開口部よりも大きいマイクロキャリアはシステムの中に残される。濾過中ホンフ 24の排出サイクル中にスクリーンに付着するマイクロキャリアは,ホンフの空気注入サイク ル中に,スクリーンから取り除かれ容器に戻される。」「(第11欄21~39行目)図3は,この発の他の実施態様を示す。ある応用ては,フロ セス容器2は,前述とは異なる開口を通して貫通される。フロセス容器2の上蓋90を通る上 部貫通ホート6か図示される。・・・・・濾過収穫物は,コンハートメント7から,流路50を通って集められる。除去された流体は,レヘル制御機構により,添加ホンフ47を作動させ,流路 51を通して容器中に流体か補充される。」「(第14欄44~63行目)本発による灌流によって達成される細胞密度は,ハッチフロ セスて達成される細胞密度の約1倍から約20倍てあることか判した。ホンフヘットを通し て細胞を動かす必要性をなくしたことて,システムから剪断の大きな原動力か失われ,容器に たた接続すれはよいたけになった。蠕動ホンフ,羽根車駆動ホンフ,旧式のタイアフラムタイ フなとの従来型のホンフは,局在的圧力勾配エネルキーを液体に加えることて流れを起こして いた。その結果生しる強い乱流は,細胞を高度に破壊する。さらにそうしたインラインホンフ は通常,フロセス容器に2つの接続を必要とする。他方,容器2に関連する加圧または減圧チ ャンハー28は,強い層流,低剪断流を生み出す。フィルタを通して培地を動かすために空気 流を駆動力として使用することかてきるため,非常に急速な接線方向流速を生しさせることか てきる。他のホンフと異なり,駆動エネルキーか広い面積を持つ液体表面に加えられる。液体 の局部に当たるわけてはないのて,培養物に剪断エネルキーを最小限加えることによってスケ ールアッフと高流量か得られる。」「(第14欄64行~15欄12行目)容器2とチャンハー30との間の脈流は,中空繊維の 内腔又はフィルタ膜への凝集体の接着を大幅に阻止するのて,この発のシステムの動力学は, 灌流の流れの稼働寿命を延長てきる。例えは,容器2からホンフ34へ培養培地か流れ,中空 繊維の内腔よりも大きい凝集体か,中空繊維アレイにより保持されるたろう。すなわち,中空 繊維かフィルタとして働き,しかしなから,繰り返す高速な,流れ方向の逆転により,堆積し た凝集体かすくに除去され,容器に掃き戻される。対照的に,流れか連続的に一方向に維持さ れる時間か長けれは長いほと,粒子か,中空繊維の入口側端部に,永久的に詰まる可能性かよ り大きくなる。容器とホンフの間を行き来するハルス流は,障害物の,繊維の両端部への接着 と成長の両方を防止する。」「(第15欄13~21行目)加えて,フィルタの閉塞は,フィルタの壁を横切って形成され る圧力差の変化により,阻止される。圧力吸収材の使用は,この工程を促進する。ホンフの機 能によるフィルタ内腔の圧力の変化は,結果的に,フィルタ壁を横切る正か負の圧力差となる。このような,フィルタ流を瞬間的に内腔に戻す反転は,フィルタ膜のセラチン形成目詰まり を防止する。」「(図1)

「(図2)

「(図3)


(3) 本発について 上記(1)によれは,本発について次の点か認められる。
 本発は,中空繊維を含むフィルタモシュールを有する連続的灌流培養システムを使用し「,凝集体を形成する固有の傾向を有する細胞」を,細胞培養培地と共に, 所望の細胞密度に達するまて培養しつつ,細胞培養物中の凝集細胞の凝集度合いを 減少させる方法てある。細胞培養物は,中空繊維を含むフィルタモシュールを循環 し,その際に細胞培養物よりも低い細胞密度を有する(細胞残屑等を含む。)液体か 流出する。また,フィルタモシュール内の流れは,フィルタモシュールの膜表面に 対して接線方向の流れと,前記膜表面に対して垂直方向の中空繊維の内側と中空繊 維の外側との間の流れてある交互接線流てある。本細書には,実施例として,ヒト細胞てあるPE.C6細胞を本発の中 空繊維を含むフィルタモシュールを有する連続的灌流培養システムを使用して培養 したことか記載されており,その際に,他の培養方法と比較して,高い細胞密度, 生産物濃度及ひ細胞生存率か得られたこと,細胞の凝集は観察されなかったことか 示されている。(4) 刊行物1発について 上記(2)によれは,刊行物1発について次の点か認められる。 刊行物1発は,細胞の培養において,従来知られている濾過の方法ては,フィルタは死んた細胞,細胞残屑,凝集体及ひ他の流体成分て目詰まりする傾向にあり, また,流体を中空繊維の中の一方向のみに流す方法ては,中空繊維の入り口か,凝 集体て目詰まりするという課題か存在していたか,中空繊維内の流体の流れを順次 反転させることにより,堆積した凝集体を除去てきるとするものてある。刊行物1発て使用する濾過システムは,1中空繊維フィルタを含むコンハート メントかハイオリアクターとタイヤフラムホンフの間に位置するものてあり,2培 養動物細胞の流体は,ハイオリアクターから中空繊維フィルタを含むコンハートメ ントを経由してタイヤフラムホンフまて流れ,3次に,タイヤフラムホンフまて流れた培養動物細胞の流体は,タイヤフラムホンフから中空繊維フィルタを含むコン ハートメント通して流れ,ハイオリアクターに戻り,4上記培養動物細胞の流体の ハイオリアクターからタイヤフラムホンフまて流れと,タイヤフラムホンフからハ イオリアクターまての流れを反復させるというものてあり,刊行物1発ては,培 養中の動物細胞の流体か中空繊維フィルタの中を往復することになる。2 取消事由1(相違点判断の誤り)について (1) 相違点2につきア 課題の認識の点に関して 原告は,凝集度合いに関連する生存細胞密度の低下に関する課題は,「凝集体を形成する固有の傾向を有する細胞」に特有のものてあるにもかかわらす,1刊行物1 発は「凝集体を形成する固有の傾向を有する細胞」を用いるものてはなく,2刊 行物1にも生存細胞密度との関係に基つく凝集体の減少という課題の記載を見出す ことかてきないから,刊行物1発の潅流培養方法を細胞培養物中の凝集細胞の凝 集度合いを減少させる方法に用いることは,当業者か容易に想到てきない旨を主張 する。しかしなから,細胞を増殖させるための装置に係る特表2003-521877 号公報(乙3)の手続補正書(16~103頁)の段落【0045】には,「凝集の 内部の細胞は外部の細胞と同様に栄養素およひ酸素を容易に吸収し廃棄産物を除去 てきないのて,凝集した細胞は,産物の産生においては有効てはない。」と記載され, この記載は,細胞を使用して何らかの生産物を製造させようとする場合には細胞か 凝集することは有利てはないことをいうものと理解てきる。また,特開平2-23 36号公報(乙4)の6頁左下欄20行目から右下欄19行目まてには,「凝集物の 破壊は,単独細胞の方か媒体により良く接触てき,その結果良好な成長と代謝活性 を招くことを可能とするように思われる。」と記載され,この記載は,上記特表20 03-521877号公報(乙3)の記載内容と同旨のことを,凝集体を解離させて単独の細胞とすることの利点の観点からいうものと理解てきる。このように,細 胞を増殖させる際に,細胞の凝集により細胞の生存率及ひ生存細胞の密度(容積単 位中の生存細胞数)か低下することは,本優先日において当業者に広く知られた 事項てあると認められ,かつ,このことは「凝集体を形成する固有の傾向を有する 細胞」に特有のものということはてきない。そして,前記1(4)のとおり,刊行物1発ては,細胞の培養において細胞か凝集 体を形成することか,細胞培養てフィルタを使用する場合の問題点として記載され ているところ,上記のとおり細胞の増殖において細胞の凝集か生しると細胞の生存 率か低下することか本優先日前に当業者に広く知られた事項てあったから,当業 者は,刊行物1の記載から,「凝集体を形成する固有の傾向を有する細胞」を含む細 胞一般か凝集したことによる細胞生存率の低下と生存細胞密度の低下という課題を 認識することかてきる。この点について,原告は,特表2003-521877号公報(乙3)の記載は, 細胞の凝集によって生存細胞密度の低下か生しることまては示唆しないと主張する か,同公報には,細胞を低い密度及ひ高い密度に培養した場合の細胞の凝集度合い と生存細胞の割合について検討している記載(手続補正書【0171】)かあり,こ の記載は,培養時の細胞の凝集と細胞の生存率生存細胞の密度とか関係すること を前提としていると理解てきる。また,原告は,特開平2-2336号公報(乙4) の上記記載は主観的な推察を述へているにすきないと主張するか,同記載は,同公 報の「考察」の項における記載てあり,「・・・・・ように思われる。」との表現をしたと しても客観的な知見を述へたものと理解てきることはらかてある。したかって, 原告の上記各主張は採用することはてきない。以上のとおりてあるから,原告の主張には理由かない。 イ 課題解手段の点に関して(ア) 動機付けに関し 原告は,1刊行物1発とヒヘッティンクとを関連付けることはてきす,2審か引用した公報は「凝集体を形成する固有の傾向を有する細胞」によって細胞培養 物中に形成される凝集細胞の凝集度合いを減少させる手段として,ヒヘッティンク を開示するものてはない旨を主張する。ところて,ヒヘッティンクとは,特開2003-219873号公報(甲17) の記載(【0024】【0025】【0029】,図2),特開2001-149099 号公報(甲18)の記載(【0005】),特開2004-2350号公報(乙1)の 記載(【0066】)及ひ特表平11-504803号公報(乙2)の記載(27頁 1~6行目)によれは,凝集した細胞をヒヘットに出し入れすることよりこれを物 理的に解離させる方法てあり,細胞を取り扱う当業者に周知の技術てあることか認 められる。そして,ここていう物理的な解離とは,凝集した細胞を複数回ヒヘット の先端部を通過させることより,その通過時に凝集細胞に剪断力を作用させ凝集し た細胞を解離させる方法ということかてきる。この技術的開示事項か,凝集した細 胞の発生原因又は発生経過により左右されるとする根拠は認められない。そして,前記1(4)のとおり,刊行物1発ては,細胞の培養において細胞か凝集 体を形成することか,細胞培養てフィルタを使用する場合の問題点として記載され ているところ,ここていう細胞の凝集体は,個々の細胞か分裂を繰り返して増殖す ることによって凝集体全体か徐々にその大きさを増したものと解される。そうしてみると,刊行物1発において,培養を継続し細胞分裂か繰り返される ことによって細胞凝集体か大きさを増した場合には,凝集細胞かヒヘットの先端部 を通過する際に働く剪断力により凝集した細胞を解離てきるという前記説示の周知 技術から,当業者てあれは,細胞か中空繊維フィルタの中を往復する場合に,刊行 物1発における中空繊維内部の流れにより働く剪断力により,凝集した細胞か解 離するものと理解する。したかって,当業者は,刊行物1発とヒヘッティンクとを関連付けて理解てき るものということかてきる。以上から,原告の上記主張は理由かない。
(イ) 阻害事由に関し 原告は,刊行物1発とヒヘッティンクとか同様の作用を有するとすると,当業者は刊行物1発か細胞を損傷し得ると予測すると主張する。
 ヒヘッティンクとは,上記(ア)のとおり,凝集細胞かヒヘットの先端部を通過する際に細胞の表面に加わる剪断力に基ついて細胞を分散させるものてあるから,例え は,ヒヘットの先端部の内径か細胞凝集塊の大きさと比較してある程度細い場合に は,過度のヒヘッティンクを行うことにより細胞にタメーシを与える場合もあり得 るものと解される。しかしなから,このような過度なヒヘッティンクを行うことは,当業者にとって 例外的な事例てあることからかてあり,上記(ア)のとおり,刊行物1発において も,細胞を培養することにより細胞凝集体か大きさを増した場合には,当該凝集し た細胞を中空繊維フィルタの中を適切に往復させることにより解離か行われるもの てあり,その工程か繰り返される間に凝集細胞か中空繊維内部からの剪断力により タメーシを受けることはないものと理解される。したかって,当業者は,細胞の培養に刊行物1発の濾過システムを用いると細 胞か損傷し得ると予測するとはいえない。以上から,原告の上記主張は理由かない。 (ウ) 小括
以上によれは,審の相違点2の判断に誤りはない。
 (2) 相違点1につき原告は,「凝集体を形成する固有の傾向を有する細胞」か形成し得る凝集細胞はマ イクロキャリアと同程度又はそれ以上の大きさを有し得るから,マイクロキャリア を使用する場合には中空繊維モシュールよりもスクリーンモシュールか適している ことを開示する刊行物2の記載は,「凝集体を形成する固有の傾向を有する細胞」に 中空繊維モシュールを使用することの阻害事由になるとの趣旨を主張する。ところて,刊行物2(訳文は乙6による。)には,次の記載かある。「(53頁左欄41行~中央欄3行目)タイヤフラムホンフと制御システムは,中空繊維を介 した交互接線流(ATF)の生成に働く。ATFとは,ハイオリアクターとホンフ間の拍動て, 行き来する溶液の可逆的な流れてある。」「(53頁右欄12~34行目)このシステムは,懸濁細胞・・・・・を含む,多くの応用に使用 てきる。このシステムは,0.2ミクロンの濾過製品流を実現し,延長した期間,高生存率を伴 う高細胞濃度て培養物を保持する能力を示す。足場依存性の,マイクロキャリアヘースの培養物中ては,ATFシステムのモシュール性は, スクリーンモシュール(M)て中空繊維モシュール(HFM)を置換することを可能にする。 これはATFシステムをマイクロキャリアヘースの培養のための高効率の灌流テハイスに変換 する。Mはマイクロキャリアをシステム中に保持し,マイクロキャリアを除いた培地か除去 される。ATFフロセスのアクティフ性は,マイクロキャリア凝集体かスクリーンに接着す るのを押しのけて防く。」刊行物2の上記記載は,足場依存性細胞を,細胞の足場てあってカラス架橋テ キストラン,ホリスチレン製等のヒース粒子なとのような(特開平8-30856 0号公報〔甲12〕の段落【0002】,【0012】),そのサイスか中空繊維の内 部の往復の流れにより変化しないマイクロキャリアに付着させた場合には,マイク ロキャリアの大きなサイスか原因て中空繊維か目詰まりしすいことから,中空繊 維モシュールてはなく,スクリーンモシュールを用いることを教示するものと理解 てきる。したかって,刊行物2の上記記載は,マイクロキャリアに付着させない細 胞を培養する場合のことについて言及したものてはない。そして,「凝集体を形成す る固有の傾向を有する細胞」か形成し得る凝集体のサイスか,マイクロキャリアと 同程度又はそれ以上のサイスに至ることかあるとしても,「凝集体を形成する固有の 傾向を有する細胞」を刊行物1発における濾過システムて培養した場合には,前 記1のとおり,凝集体は解離されるものと理解てきるし,刊行物2のATFシステムは,細胞を含む流体か中空繊維の内部を往復する点において刊行物1発と同様 のものてある。そうすると,刊行物2の上記記載を参照した当業者てあっても,「凝 集体を形成する固有の傾向を有する細胞」を培養する場合に,中空繊維モシュール よりもスクリーンモシュールか適していると考える理由はない。以上から,原告の上記主張は理由かない。 したかって,審の相違点1の判断に誤りはない。(3) 本発の効果について 原告は,本発は,刊行物1発に比して,「凝集体を形成する固有の傾向を有する細胞」による凝集細胞の凝集度合いを減少させ,その結果,高い細胞密度てあ りなから,高い細胞生存率を達成することかてきる旨を主張する。しかしなから,前記1のとおり,当業者は,刊行物1発の濾過システムにより, 凝集する細胞を培養した場合てあっても,その凝集度合いを減少させることか可能 てあり,その結果,本発と同様の高い細胞密度,高い細胞生存率か達成てきる という効果を有するものと予測する。したかって,原告の上記主張を採用することはてきない。 以上から,審の発の効果の判断に誤りはない。3 取消事由2(手続違背)について
原告は,審判手続には,原告の反論及ひ補正の機会を不当に奪った手続の瑕疵か ある旨を主張する。しかしなから,1審か特開平8-308560号公報(甲12)及ひ特開20 02-534999号公報(甲13)の記載を引用したのは,本発の「凝集体 を形成する固有の傾向を有する細胞」の意義を確定するための前提となる技術常識 を認定するためてあり,また,審か特開平5-41984号公報(甲14)及ひ 特開平2-113896号公報(甲15)の記載を引用したのは,刊行物2の上記 1(2)の記載の意義をらかにするための前提となる技術常識を認定するためてあり,2審か特開2003-516733号公報(甲11)及ひ特表2003-5 21877号公報(甲16)の記載を引用したのは,本優先日前の周知技術てあ った「生物学的薬剤を製造するのに用いる細胞」を把握するためてあり,3審か 特開2003-219873号公報(甲17)及ひ特開2001-149099号 公報(甲18)の記載を引用したのは,ヒヘッティンクか本優先日前の慣用技術 てあったことを示すための例示としててある。また,4審か相違点2の判断に当たってヒヘッティンクを摘示したのは,拒絶 査定(甲5)にある「凝集体に剪断力を作用させて脱凝集させること」の典型例と してヒヘッティンクを挙け,刊行物1発の中空繊維の内腔を行き来する交互接線 流により,細胞凝集体を脱凝集させることか可能てあることを説したにすきす, 拒絶査定において審査官か示した判断と審の判断には論旨の変更はない。したかって,審は新たな拒絶理由を追加したものてはないから,審判手続にお いて原告に対し意見書の提出及ひ補正の機会を与える必要は認められない。以上から,審判手続に特許法159条2項て準用する同法50条に違背した違法 はない。よって,原告の上記主張は,理由かない。
第6 結論 以上によれは,原告か主張する取消事由はいすれも理由かない。
 よって,主文のとおり判する。 知的財産高等裁判所第2部
裁判長裁判官
裁判官
裁判官
清水節
中村恭
中武由紀

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